- El agar entérico Hektoen es un medio selectivo y diferencial diseñado para aislar y diferenciar miembros de las especies Salmonella y Shigella de otras Enterobacteriaceae.
- El medio fue introducido en 1968 por Sylvia King y William I. Metzger. Formularon el medio HE Agar mientras trabajaban en el Instituto Hektoen en Chicago, para aumentar la recuperación de Salmonella y Shigella de muestras clínicas.
Table of Contents
Composición del agar entérico Hektoen
Ingredientes | Gms / litro |
Peptona proteasa | 12.00 |
Extracto de levadura | 3.000 |
Lactosa | 12.00 |
Sacarosa | 2.000 |
Salicina | 9.000 |
Mezcla de sales biliares | 9.000 |
Cloruro de sodio | 5.000 |
Tiosulfato de sodio | 5.000 |
Citrato de amonio férrico | 1.500 |
Fucsina ácida | 0,100 |
Azul de bromotimol | 0,065 |
Así que eso | 14.00 |
PH final (a 25 ° C): 7,5 ± 0,2
Principio del agar entérico hectona
- El agar Hektoen entérico (HE) es un medio que se basa en el uso de sales biliares para la inhibición selectiva y dos sistemas indicadores:
- azul de bromotimol y fucsina ácida como indicadores de disimilación de carbohidratos y
- hierro férrico como indicador de la formación de sulfuro de hidrógeno a partir de tiosulfato.
- El agar HE permite un buen crecimiento de Shigella porque la inhibición de estos organismos por las sales biliares se reduce mediante la adición de cantidades relativamente grandes de peptona y carbohidratos.
- El medio proporciona una buena diferenciación colonial e inhibe algunos coliformes y otras bacterias no fermentadoras de lactosa, lo que facilita la identificación de Salmonella y Shigella en productos alimenticios.
- El agar HE está compuesto de proteosa peptona, extracto de levadura, cloruro de sodio, lactosa, sacarosa, salicina, azul de bromotimol, fucsina ácida, tiosulfato de sodio, citrato de hierro (III) amonio, sales biliares, agar y agua destilada o desionizada.
- En agar HE, Salmonella produce colonias transparentes de color verde o azul verdoso con o sin centros negros y aparece como colonias casi completamente negras.
- Shigella produce colonias transparentes y verdes. Como otros organismos forman colonias similares a Salmonella y Shigella , son necesarias pruebas de confirmación bioquímicas y serológicas.
- Las bacterias gramnegativas que fermentan lactosa, sacarosa o salicina producen colonias de color salmón.
Preparación y método de uso del agar entérico Hektoen
- Suspenda 72,66 gramos en 1000 ml de agua purificada / destilada.
- Caliente a ebullición para disolver el medio por completo.
Nota: NO AUTOCLAVE.
- Enfriar a 45-50 ° C.
- Mezclar bien y verter en placas de Petri estériles.
- Inocular el medio con heces frescas suspendidas en solución de Ringer o inocular directamente con hisopos rectales .
- Esparcir el inóculo para obtener colonias bien separadas .
- Incubat e durante 18-24 horas a 37 ° C .
- Una mayor incubación mejorará la diferenciación entre Salmonella y Shigella .
Interpretación de los resultados del agar entérico Hektoen
- Los fermentadores rápidos de lactosa (como E. coli ) se inhiben moderadamente y producen colonias de color naranja brillante a rosa salmón.
- Las colonias de Salmonella son de color azul verdoso típicamente con centros negros del gas de sulfuro de hidrógeno.
- Shigella parece más verde que Salmonella , y el color se desvanece hacia la periferia de la colonia.
- Las cepas de Proteus están algo inhibidas; las colonias que se desarrollan son pequeñas, transparentes y de apariencia más brillante o acuosa que las especies de Salmonella o Shigella .
Organismos | Crecimiento |
Salmonella typhimurium | Azul verdoso con o sin centros negros |
Salmonella Abony | Azul verdoso con o sin centros negros |
Salmonella enteritidis | Azul verdoso con o sin centros negros |
Salmonella Typhi | Azul verdoso con o sin centros negros |
Escherichia coli | Naranja (puede tener un precipitado de bilis) |
Shigella flexneri | Azul verdoso |
Shigella sonnei | Crecimiento de bueno a excelente; colonias verde claro |
Proteo | Variable, azul verdoso a azul o salmón, la mayoría de las cepas con centro negro o completamente negro |
Enterobacter / Klebsiella | Grande, de color amarillo a salmón |
Usos del agar entérico Hektoen
- El medio de agar entérico Hektoen se recomienda para el aislamiento diferencial y selectivo de las especies de Salmonella y Shigella a partir de muestras patológicas entéricas de acuerdo con la Farmacopea de los Estados Unidos.
- Este medio es recomendado por la Farmacopea de los Estados Unidos, 2009 para probar la presencia de Salmonella en suplementos dietéticos.
- Este medio se recomienda en las pruebas de Salmonella en muestras de alimentos según varios estándares.
- El agar HE se utiliza actualmente como medio de placa directo e indirecto para muestras fecales para mejorar la recuperación de especies de Salmonella y Shigella de grandes cantidades de flora fecal normal mixta.
- Se utiliza como medio de placa para recuperar patógenos gastrointestinales, como Salmonella y Shigella , de muestras de alimentos, agua y heces que se sospecha contienen estos organismos.
Limitaciones del agar entérico hectona
- Un solo medio rara vez es capaz de recuperar todos los patógenos contenidos en una muestra. Por lo tanto, se deben inocular con la muestra medios adicionales para el aislamiento de Salmonella y / o Shigella y posiblemente para otros patógenos entéricos.
- Las colonias de Proteus mirabilis pueden parecerse a Salmonella en este medio.
- Ciertas cepas de Shigella pueden necesitar una incubación de 42 a 48 h.
- Aunque ciertas pruebas de diagnóstico se pueden realizar directamente en este medio, las pruebas bioquímicas y, si está indicado, inmunológicas utilizando cultivos puros son necesarias para una identificación completa.
- Las colonias sospechosas de ser Salmonella o Shigella deben confirmarse e identificarse bioquímica y serológicamente.
Dr. Martin Passen, a dedicated nutrition educator with a master’s in nutrition education and nearing completion of a clinical nutrition and dietetics master’s. Passionate about sharing valuable information effectively.