El medio Cistina-Lactosa-Electrolito-Deficiente (CLED), descrito por primera vez por Sandys y posteriormente modificado por Mackey y Sandys, se utiliza generalmente para el diagnóstico de bacteriología urinaria de rutina como un medio no selectivo capaz de soportar el crecimiento de la mayoría de los patógenos urinarios. Agar CLED es un medio diferencial utilizado para el aislamiento y enumeración de bacterias de la orina. El medio apoya el crecimiento de todos los patógenos potenciales urinarios y proporciona una morfología de colonia distinta. Apoya el crecimiento de patógenos y contaminantes urinarios y brinda una buena diferenciación colonial sin la propagación de especies de Proteus debido a su falta de electrolitos.
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Composición del Agar CLED
Constituyentes | g / litro |
Lactosa | 10.0 |
Digerido enzimático de gelatina | 4.0 |
Digerido enzimático de caseína | 4.0 |
Extracto de carne | 3,0 |
L-cistina | 0,128 |
Azul de bromotimol | 0,02 |
Así que eso | 15.0 |
pH 7,3 +/- 0,2
Principio de agar CLED
El CLED se compone de digestión enzimática de caseína, digestión enzimática de gelatina y extracto de carne que proporcionan nitrógeno, vitaminas, minerales y aminoácidos esenciales para el crecimiento. La L-cistina apoya el crecimiento de la colonia de coliformes enanos dependientes de cisteína. La lactosa es el carbohidrato fermentable que proporciona carbono y energía. Los organismos capaces de fermentar lactosa reducirán el pH y cambiarán el color del medio de verde a amarillo. El cambio de color está indicado por la presencia del indicador de pH Bromthymol Blue. El agar presente en el medio es el agente solidificante.
Preparación de agar CLED
- Suspenda 36 gramos del medio en un litro de agua destilada.
- Mezclar bien y calentar con agitación frecuente y hervir durante un minuto hasta que se disuelva completamente.
- Esterilice en autoclave a 121 ° C durante 15 minutos.
- Enfriar a 50 ° C, mezclar bien y distribuir en placas. Cuando el medio se solidifique, invierta las placas para evitar el exceso de humedad. El medio preparado debe almacenarse a 8-15 ° C.
Características de las colonias de varios organismos en agar CLED
Diferentes microorganismos muestran diversas respuestas culturales en el agar CLED en la atmósfera y temperatura adecuadas después de 18 a 24 horas de incubación:
Organismo | Morfología de la colonia |
Escherichia coli | Colonias grandes, elevadas, amarillas, opacas con un centro amarillo más intenso; medio amarillento |
Especies de Klebsiella | colonias extremadamente mucoides que varían en color de amarillo a azul blanquecino. medio amarillento. |
Especies de proteus | colonias de color azul translúcido generalmente más pequeñas que Escherichia coli. azul verdoso a azul medio. |
Especies de Salmonella | colonias azules planas |
Pseudomonas aeruginosa | colonias verdes con superficie mate típica y periferia rugosa. Olor “dulce”. Agar azul verdoso |
Enterococcus faecalis | colonias amarillas de aproximadamente 0,5 mm de diámetro. medio amarillo |
Staphylococcus aureus | colonias de color amarillo intenso de aproximadamente 0,75 mm de diámetro, de color uniforme. medio amarillo |
Corinebacterias | colonias grises muy pequeñas |
Lactobacilos | similar a las corinebacterias pero con una superficie más rugosa |
Usos del agar CLED
- Se utiliza para cultivos de orina de rutina y para el crecimiento y recuento de organismos del tracto urinario.
- Ayuda en la diferenciación del fermentador de lactosa y el no fermentador de lactosa.
- Es adecuado para el aislamiento y recuento de muchos microorganismos de crecimiento aeróbico, como Enterobacteriaceae, Pseudomonas y otros bacilos gramnegativos no fermentadores, enterococos, estafilococos, especies de Candida y muchos otros a partir de muestras de orina.
Limitaciones del agar CLED
- Los estreptococos y otros organismos que requieren sangre o suero para su crecimiento pueden recuperarse de manera insuficiente en este medio o pueden necesitar una incubación prolongada. Por lo tanto, la muestra también debe cultivarse en una placa de agar sangre si se esperan tales organismos.
- Los patógenos genitourinarios como Neisseria gonorrhoeae , Gardnerella vaginalis , Chlamydia , Ureaplasma u otros organismos exigentes no crecen en este medio.
- Las pruebas serológicas que utilizan cultivos puros son necesarias para una identificación completa.
Dr. Martin Passen, a dedicated nutrition educator with a master’s in nutrition education and nearing completion of a clinical nutrition and dietetics master’s. Passionate about sharing valuable information effectively.