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Definición de la prueba de Sakaguchi
La prueba de Sakaguchi es una prueba bioquímica que consiste en una reacción colorimétrica para la detección y cuantificación de grupos guanidinio, utilizada como prueba cualitativa para la arginina libre o en proteína. La prueba fue descubierta por el científico de alimentos japonés Shoyo Sakaguchi y recibió su nombre en 1925. La prueba de Sakaguchi es un ejemplo de reacciones de color o prueba que se realiza para la detección de aminoácidos o proteínas . La prueba es una prueba específica para la arginina en la que el grupo guanidinio de la arginina reacciona con 1-naftol o α-naftol para producir un producto coloreado. Es una prueba cualitativa, y la cuantificación de la arginina se ve obstaculizada en esta prueba debido a la lenta tasa de desarrollo del color y la destrucción de algunos grupos de guanidinio por el reactivo.
Objetivo de la prueba de Sakaguchi
- Detectar la presencia de arginina en forma libre o en proteínas.
Principio de la prueba de Sakaguchi
La prueba de Sakaguchi se basa en el principio de reacción entre el 1-naftol y los grupos guanidinio en la arginina, en presencia de un agente oxidante. El mecanismo exacto de la reacción aún no se conoce; sin embargo, la reacción da como resultado la formación de un complejo de color rojo debido a la formación de una estructura similar a un indol. El reactivo de Sakaguchi consta de hipobromito de sodio y 1-naftol. El hipobromito de sodio actúa como un agente oxidante que facilita el enlace de hidrógeno entre dos moléculas de arginina.
Requisitos
Reactivo
- Reactivo de Sakaguchi: 1-naftol al 1% en alcohol con unas gotas de solución de hipobromito de sodio al 10% de agua con bromo.
- 40% de NaOH
- Muestra (0,1% de arginina o 0,1% de creatina)
Material requerido
- Tubos de ensayo
- Soporte para tubos de ensayo
- Pipetas
Procedimiento de la prueba de Sakaguchi
- Se añaden aproximadamente 3 ml de la solución de prueba en un tubo de ensayo, al que se agrega 1 ml de NaOH al 40% y se mezcla correctamente.
- Luego, se agregan dos gotas de 1-naftol al mismo tubo de ensayo y se mezclan bien.
- Ahora, se agregan 4-5 gotas de hipobromito de sodio al 10% o agua con bromo.
- Se observa el desarrollo del color en el tubo de ensayo.
Resultado e interpretación de la prueba de Sakaguchi
- Resultado positivo: un resultado positivo en la prueba de Sakaguchi se demuestra por la formación de color rojo. Esto indica la presencia de un compuesto de arginina o guanidinio.
- Resultado negativo: un resultado negativo en la prueba de Sakaguchi se demuestra por la ausencia de color rojo. Esto indica una ausencia de arginina o un compuesto de guanidinio.
Usos de la prueba de Sakaguchi
- La prueba de Sakaguchi es una prueba bioquímica para la detección de arginina en forma libre o combinada en proteínas.
- La prueba es cualitativa pero puede hacerse cuantitativa mediante la adición de urea que estabiliza el producto coloreado.
Limitaciones
- El análisis cuantitativo del producto coloreado no es posible con esta prueba ya que la velocidad de la reacción de Sakaguchi es lenta.
- De manera similar, algunos de los grupos guanidinio en la solución pueden ser destruidos por el hipoclorito, resultando en dificultades en los resultados de las pruebas.
Dr. Martin Passen, a dedicated nutrition educator with a master’s in nutrition education and nearing completion of a clinical nutrition and dietetics master’s. Passionate about sharing valuable information effectively.