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Definición de la prueba de Molisch
La prueba de Molisch es una prueba grupal para todos los carbohidratos , ya sean libres o unidos a proteínas o lípidos . Es una prueba sensible que requiere precisión para la detección de carbohidratos.
Objetivos de la prueba de Molisch
- Detectar la presencia de carbohidratos en una muestra determinada.
- Distinguir los carbohidratos de otras biomoléculas.
Principio de la prueba de Molisch
- La reacción se basa en el hecho de que el ácido concentrado cataliza la deshidratación de los azúcares para formar furfural (a partir de pentosas) o hidroximetilfurfural (a partir de hexosas).
- Cualquiera de estos aldehídos se condensa con dos moléculas de naftol para formar un complejo de color violeta o violeta en la interfaz del ácido y la capa de prueba.
- Si el carbohidrato es poli- o disacárido, una glicoproteína o glicolípido, el ácido primero lo hidroliza en monosacáridos componentes, que se deshidratan para formar furfural o sus derivados.
- Se puede observar un anillo verde si hay impurezas presentes en el reactivo, ya que podrían interactuar con el α-naftol y el ácido.
- Se ve un anillo de corteza si se usa una solución de azúcar concentrada. Esto podría deberse a la carbonización del azúcar debido al ácido.
Requisitos
1. Reactivo
- Reactivo de Molisch: disolver 3,75 g de α-naftol en 25 ml de etanol al 99%. Este reactivo debe prepararse fresco.
- Ácido sulfúrico concentrado
- Muestra de prueba
2. Materiales necesarios
- Tubos de ensayo
- Soporte para tubos de ensayo
- Pipeta
- Agua destilada
Procedimiento de la prueba de Molisch
- Tome 2 ml de cada agua destilada y pruebe las soluciones de azúcar en cuatro tubos de ensayo por separado.
- Agregue dos gotas de reactivo Molisch a cada tubo.
- Sostenga el tubo de ensayo en una posición inclinada y agregue suavemente 1 ml de H 2 SO 4 concentrado a lo largo de la pared del tubo de ensayo. No mezcle el ácido con la solución. Puede formarse un anillo negro si el ácido concentrado no se agrega lentamente, ya que el calor generado por la reacción puede carbonizar los carbohidratos.
- Observe en el tubo de ensayo la formación de un anillo de color púrpura en la capa entre la solución y el ácido.
Resultado e interpretación de la prueba de Molisch
- La formación del anillo de color púrpura ocurre en la interfaz entre el ácido sulfúrico y la solución de prueba.
- El ácido sulfúrico permanece por encima de la solución de prueba ya que el ácido es más denso que la solución de prueba.
- La ausencia de color indica un resultado negativo.
Usos de la prueba de Molisch
- La prueba de Molisch se utiliza para detectar la presencia de carbohidratos en diferentes muestras.
- Puede usarse para detectar la formación de carbohidratos como subproducto en diferentes reacciones y distinguirlo de otras biomoléculas.
Limitaciones de la prueba de Molisch
- Las triosas y tetrosas no tienen los cinco átomos de carbono necesarios para la formación de furfural, por lo que no dan un resultado positivo para esta reacción.
- La prueba de Molisch no es una prueba específica para carbohidratos. Los furfurales como tales o la sustancia productora de furfural, algunos ácidos orgánicos como el ácido cítrico, el ácido láctico, el ácido oxálico, el ácido fórmico, etc. pueden dar un resultado positivo.
Dr. Martin Passen, a dedicated nutrition educator with a master’s in nutrition education and nearing completion of a clinical nutrition and dietetics master’s. Passionate about sharing valuable information effectively.