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Objetivo de la prueba del medio de leche tornasol
- Diferenciar microorganismos basados en diversas reacciones metabólicas en la leche de tornasol, que incluyen fermentación, reducción, formación de coágulos, digestión y formación de gas.
- La leche de tornasol se usa principalmente para diferenciar miembros dentro del género Clostridium .
- Diferencia las Enterobacteriaceae de otros bacilos gramnegativos según la capacidad de los entéricos para reducir el tornasol.
- La leche de tornasol también se utiliza para cultivar y mantener cultivos de bacterias del ácido láctico.
Principio de la prueba del medio de leche tornasol
La leche es un excelente medio para el crecimiento de microorganismos porque contiene la proteína de la leche, caseína, azúcar, lactosa, vitaminas, minerales y agua. Litmus, un indicador de pH que se incorpora al medio para la detección de producción de ácidos o álcalis y actividades de oxidación-reducción. La fermentación de la lactosa de la leche con la producción de ácido láctico se demuestra cuando el tornasol cambia de azul a rosa como resultado de la producción de ácido. La acumulación de ácido actúa sobre la caseína, dando como resultado la formación de un coágulo debido a la precipitación de la caseína como caseinato de calcio. Con algunos organismos, la cuajada se encoge y se forma suero en la superficie. La cuajada ácida se identifica por el coágulo que permanece inmóvil cuando se invierte el tubo. Algunas bacterias producen la enzima renina que actúa sobre la caseína y, en presencia de iones de calcio, forma paracaseinato que es insoluble y se llama cuajo. A diferencia de la cuajada ácida, es un coágulo semisólido que fluirá lentamente al inclinar el tubo. Algunas bacterias poseen la enzima proteolítica caseinasa e hidrolizan la caseína. La hidrólisis de caseína da como resultado la liberación de grandes cantidades de amoníaco que hace que el medio sea alcalino con mal olor, el tornasol se vuelve azul violáceo. Con una incubación adicional, se produce un aclaramiento opaco de la leche a medida que la caseína se hidroliza a péptidos y aminoácidos. El sobrenadante líquido opaco que tiene apariencia de suero se vuelve de color marrón. Además, algunos organismos reducen el tornasol, en cuyo caso el medio se vuelve incoloro en el fondo del tubo. A diferencia de la cuajada ácida, es un coágulo semisólido que fluirá lentamente al inclinar el tubo. Algunas bacterias poseen la enzima proteolítica caseinasa e hidrolizan la caseína. La hidrólisis de caseína da como resultado la liberación de grandes cantidades de amoníaco que hace que el medio sea alcalino con mal olor, el tornasol se vuelve azul violáceo. Con una incubación adicional, se produce un aclaramiento opaco de la leche a medida que la caseína se hidroliza a péptidos y aminoácidos. El sobrenadante líquido opaco que tiene apariencia de suero se vuelve de color marrón. Además, algunos organismos reducen el tornasol, en cuyo caso el medio se vuelve incoloro en el fondo del tubo. A diferencia de la cuajada ácida, es un coágulo semisólido que fluirá lentamente al inclinar el tubo. Algunas bacterias poseen la enzima proteolítica caseinasa e hidrolizan la caseína. La hidrólisis de caseína da como resultado la liberación de grandes cantidades de amoníaco que hace que el medio sea alcalino con mal olor, el tornasol se vuelve azul violáceo. Con una incubación adicional, se produce un aclaramiento opaco de la leche a medida que la caseína se hidroliza a péptidos y aminoácidos. El sobrenadante líquido opaco que tiene apariencia de suero se vuelve de color marrón. Además, algunos organismos reducen el tornasol, en cuyo caso el medio se vuelve incoloro en el fondo del tubo. el tornasol se vuelve azul violáceo. Con una incubación adicional, se produce un aclaramiento opaco de la leche a medida que la caseína se hidroliza a péptidos y aminoácidos. El sobrenadante líquido opaco que tiene apariencia de suero se vuelve de color marrón. Además, algunos organismos reducen el tornasol, en cuyo caso el medio se vuelve incoloro en el fondo del tubo. el tornasol se vuelve azul violáceo. Con una incubación adicional, se produce un aclaramiento opaco de la leche a medida que la caseína se hidroliza a péptidos y aminoácidos. El sobrenadante líquido opaco que tiene apariencia de suero se vuelve de color marrón. Además, algunos organismos reducen el tornasol, en cuyo caso el medio se vuelve incoloro en el fondo del tubo.
Medio para prueba de medio de leche tornasol
Leche desnatada en polvo (100 g), tornasol (0,5 g), sulfito de sodio (0,5 g), por 1000 ml, pH 6,8.
Procedimiento de prueba del medio de leche tornasol
- Inocular medio de leche de tornasol con 4 gotas de caldo de cultivo de 24 horas.
- Incubar a 37 ° C en aire ambiente durante 24-48 horas.
- Observe diariamente durante 7 días la reacción alcalina (el tornasol se vuelve azul), la reacción ácida (el tornasol se vuelve rosa), la reducción del indicador, el coágulo de ácido, el coágulo de cuajo y la peptonización.
- Pueden ocurrir múltiples cambios durante el período de observación y registrar todos los cambios.
Interpretación de los resultados de la prueba del medio de leche tornasol
Prueba positiva
PH ácido: color rosa a rojo
PH alcalino: color azul violáceo
Reducción: blanco
Cuajada ácida: cuajada dura con sobrenadante transparente (suero)
Digestión: disolución del coágulo con un líquido transparente, grisáceo y acuoso y un coágulo rosa encogido e insoluble.
Cuajada de cuajo: cuajada blanda seguida de peptonización (pH alcalino, sobrenadante marrón)
Producción de gas: burbujas en la leche coagulada.
Prueba negativa: el color y la consistencia siguen siendo los mismos
Limitación de la prueba del medio de leche tornasol
Las reacciones con los medios tornasol no son específicas y deben seguirse con pruebas adicionales para la identificación definitiva de microorganismos.
Dr. Martin Passen, a dedicated nutrition educator with a master’s in nutrition education and nearing completion of a clinical nutrition and dietetics master’s. Passionate about sharing valuable information effectively.