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Definición de la prueba de Heller
La prueba de Heller es una prueba bioquímica que se realiza para detectar proteínas en una muestra mediante la desnaturalización de esas proteínas mediante la adición de ácidos fuertes. La prueba de Heller generalmente usa ácido nítrico concentrado para la desnaturalización de proteínas. La prueba se realiza con fines clínicos para detectar proteínas anormales en fluidos biológicos, incluida la orina. La prueba de Heller es un tipo de prueba de precipitación.donde la precipitación se produce por desnaturalización. La prueba fue descubierta y nombrada en honor al químico austriaco Johann Florian Heller mientras estudiaba la naturaleza bioquímica de la orina. Las proteínas más comunes que se detectan mediante la prueba de Heller en la orina son la albúmina y la globulina. La prueba es clínicamente importante ya que es simple y requiere un mínimo de reactivo. También detecta proteínas en fluidos biológicos que representan las características patológicas de ciertas enfermedades, ayudando así en el diagnóstico de enfermedades.
Objetivos de la prueba de Heller
- Detectar la presencia de proteínas en una muestra determinada.
- Detectar proteínas en fluidos biológicos como orina y sangre .
- Identificar la albúmina y la globulina que pueden estar presentes en la orina.
Principio de la prueba de Heller
La prueba se basa en el principio de precipitación de proteínas, que en este caso tiene lugar en presencia de ácidos minerales como el ácido nítrico. La precipitación de proteínas por ácidos se basa en los cambios en el pH de la solución. Como todas las proteínas tienen un punto isoeléctrico definido o valor pI, los cambios en el pH de la solución afectan la estructura de la proteína. La adición de ácidos a una solución reduce su valor de pH. A medida que el valor disminuye, las moléculas de proteína se cargan positivamente debido a la captura de protones por los grupos amino presentes en las proteínas. En estado acuoso, la esfera de hidratación que rodea a la proteína se rompe debido a las cargas. La interrupción provoca un desequilibrio en la estructura de la proteína, lo que resulta en precipitación. La adición de ácido a una muestra de proteína provoca la precipitación de proteínas en el punto donde el ácido entra en contacto con la solución de proteína. Como resultado, se forma un anillo coagulado blanco entre las dos capas de solución de proteína y el ácido mineral (HNO3 ).
Requisitos
Reactivo
- Ácido nítrico (HNO 3 )
- Muestra
Materiales necesarios
- Tubos de ensayo
- Soporte para tubos de ensayo
- Pipetas
Procedimiento de la prueba de Heller
- En un tubo de ensayo limpio y seco, se toman 2 ml de ácido nítrico concentrado.
- A esto se le añaden 2 ml de orina u otra muestra. La muestra debe verterse desde la pared lateral del tubo de ensayo en una posición inclinada para formar una capa de la muestra por encima del ácido nítrico.
- A continuación, se observa el tubo de ensayo en busca de la formación de un anillo blanco en la unión de las dos capas.
Resultado e interpretación de la prueba de Heller
- Resultado positivo: un resultado positivo está representado por la formación de un anillo blanco (proteína precipitada) en la unión de las dos capas distintas. Esto indica la presencia de proteínas en la muestra dada.
- Resultado negativo: un resultado negativo está representado por la ausencia de un anillo blanco. Esto indica la ausencia de proteína en la muestra.
Usos de la prueba de Heller
- La prueba de Heller es una prueba biológica utilizada para la detección de proteínas en fluidos biológicos.
- La prueba es mejor que otras pruebas similares, ya que requiere una pequeña cantidad de muestra de orina.
Limitaciones
- El ácido concentrado utilizado en la prueba es corrosivo y, por lo tanto, debe manipularse con cuidado.
- La prueba es cualitativa y no da la concentración de proteína presente en la muestra.
Dr. Martin Passen, a dedicated nutrition educator with a master’s in nutrition education and nearing completion of a clinical nutrition and dietetics master’s. Passionate about sharing valuable information effectively.