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Definición de la prueba de Fehling
La prueba de Fehling es una prueba química que se utiliza para diferenciar entre azúcares reductores y no reductores. Esta prueba también se puede utilizar para distinguir los carbohidratos del grupo funcional cetona y los carbohidratos solubles en agua.
Objetivos de la prueba de Fehling
- Detectar la presencia de carbohidratos en una solución.
- Diferenciar entre azúcares reductores y no reductores.
Principio de la prueba de Fehling
- Los carbohidratos que tienen grupos carbonilo libres o potencialmente libres (aldehído o cetona) pueden actuar como azúcares reductores.
- La solución de Fehling tiene un color azul profundo y consiste en sulfato de cobre mezclado con tartrato de sodio y potasio y álcali fuerte, que generalmente es hidróxido de sodio.
- Al calentarla, la muestra con la solución de Fehling, el complejo bistartarocuprato (II) oxida las aldosas a los ácidos aldónicos correspondientes.
- En el proceso, los iones de cobre (II) del complejo se reducen a un precipitado insoluble de color amarillo o rojo o a iones de óxido cuproso (I) (Cu 2 O).
- Las cetonas, por otro lado, se oxidan para producir cadenas de ácidos más cortas.
- Los iones tartrato evitan la formación de Cu (OH) 2 insoluble a partir de la reacción del sulfato de cobre y el hidróxido de sodio presentes en la solución formando un complejo de bistartarocuprato (II).
- Este complejo libera iones cúpricos lentamente para su reducción, evitando así la formación de óxido cúprico negro.
- Si la solución de Fehling se calienta en ausencia de azúcares reductores, forma un precipitado negro de óxido cúprico.
Reacción
2Cu (OH) 2 + azúcar reductor → 2Cu 2 O + Ácido aldónico
Requisitos
1. Reactivo
- Solución A de Fehling: disolver 7 g de CuSO 4 .7H 2 O en 100 ml de agua.
- Solución de Fehlings B: disolver 24 g de KOH y 34,6 g de tartrato de sodio y potasio en 100 ml de agua.
- Solución de Fehling: Mezcle volúmenes iguales de ambas soluciones justo antes de usarlas.
- Muestra (5% de glucosa, 5% de sacarosa, 5% de fructosa, 5% de almidón, 5% de lactosa)
2. Materiales necesarios
- Pipetas
- Tubos de ensayo
- Soporte para tubos de ensayo
3. Equipo
- Baño de agua
Procedimiento de la prueba de Fehling
- Tome 1 ml de una muestra determinada en un tubo de ensayo limpio y seco. La concentración de las muestras de prueba debe ser del 5% (p / v).
- Toma el control de 1 ml de agua destilada en otro tubo.
- Agregue aproximadamente 2-3 gotas de reactivo de Fehling a ambos tubos y mézclelos en un vórtice.
- Mantenga los tubos de ensayo en el baño de agua durante 1-2 minutos.
- Observe la apariencia de color en los tubos de ensayo.
- Anote la apariencia de color que se ve en los tubos de ensayo.
Resultado e interpretación de la prueba de Fehling
- La aparición de un precipitado marrón rojizo indica un resultado positivo y la presencia de azúcares reductores.
- La ausencia del precipitado rojizo o la aparición de un color azul intenso indica un resultado negativo y falta de azúcares reductores.
Usos de la prueba de Fehling
- La prueba de Fehling se utiliza para distinguir entre la presencia de aldehídos y cetonas en los carbohidratos, ya que los azúcares cetónicos, excepto que las alfa-hidroxi-cetonas no reaccionan en esta prueba.
- La prueba de Fehling se realiza en instalaciones médicas para detectar la presencia de glucosa en la orina. Esto ayuda a identificar si el paciente tiene diabetes o no.
Limitaciones de la prueba de Fehling
- Los aldehídos aromáticos no pueden detectarse mediante esta prueba.
- Esta reacción tiene lugar solo en un ambiente alcalino. En un ambiente ácido, los iones de cobre (II) se estabilizarían y no se oxidarían fácilmente, fallando así la reacción.
Dr. Martin Passen, a dedicated nutrition educator with a master’s in nutrition education and nearing completion of a clinical nutrition and dietetics master’s. Passionate about sharing valuable information effectively.