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Definición de la prueba de Ehrlich
La prueba de Ehrlich es una prueba bioquímica que se utiliza para la detección del aminoácido triptófano en una proteína.muestra. La prueba de Ehrlich también se denomina prueba de p-dimetilamino benzaldehído, que lleva el nombre del reactivo de Ehrlich. La prueba lleva el nombre del ganador del Premio Nobel Paul Ehrlich, quien identificó esta prueba durante la distinción entre tifoidea y diarrea simple. También se denomina prueba de aminoácidos específicos, ya que detecta un determinado aminoácido, el triptófano. Esta prueba se ha utilizado en laboratorios para pruebas médicas, algunas para pruebas de drogas y otras para el diagnóstico de diversas enfermedades. El diagnóstico de enfermedades hepáticas, síndrome carcinoide, procesos hemolíticos y oclusión del colédoco también se puede realizar con la prueba de Ehrich. Una de las formas comunes de la prueba de Ehrlich es la prueba puntual utilizada para la detección de compuestos psicoactivos como triptaminas y ergoloides (como LSD). Se obtiene una prueba de Ehrlich positiva para el opio natural, ya que contiene triptófano.
Objetivos de la prueba de Ehrlich
- Detectar la presencia de triptófano en una muestra determinada.
- Distinguir entre fiebre tifoidea y diarrea.
- Identificar la presencia de urobilinógeno en una muestra de orina.
Principio de la prueba de Ehrlich
El reactivo de Ehrlich consiste en p-dimetilamino benzaldehído. La reacción que se produce en la prueba se basa en el principio de que, en condiciones ácidas, el reactivo de Ehrlich sufre una sustitución electrofílica. La sustitución se produce en el anillo indol o bencilpirrol del triptófano para producir un producto de condensación azul violeta. El producto de condensación formado después de la reacción se mejora aún más mediante la adición de NaNO 2 .
Reacción
Triptófano + reactivo de Ehrlich (p-dimetilamino benzaldehído) → Producto de condensación azul violeta
Requisitos
Reactivos
- Reactivo de Ehrlich: El reactivo de Ehrlich se prepara mediante la adición de aproximadamente 0,5 a 2,0 gramos de p-dimetilamino benzaldehído en 50 ml de etanol al 95%. A esto se le añaden 50 ml de H 2 SO 4 al 10% .
- Muestra de proteína
- Concentración HCl
- NaNO 2
Materiales necesarios
- Tubos de ensayo
- Soporte para tubos de ensayo
- Pipetas
Procedimiento de la prueba de Ehrlich
- Se agregan aproximadamente 3-4 ml de solución de proteína diluida o muestra de orina a un tubo de ensayo.
- Luego, el líquido se hierve con 1 ml de HCl concentrado.
- Se añaden unas gotas del reactivo de Ehrlich (p-dimetilamino benzaldehído en H 2 SO 4 ) al tubo de ensayo.
- Luego, se agita el tubo de ensayo para mezclar el contenido correctamente.
- Se observa el cambio de color en el tubo de ensayo. Si se observa un color azul-violeta, se añaden unas gotas de solución de NaNO 2 al tubo de ensayo para obtener un color azul.
Resultado e interpretación de la prueba de Ehrlich
- Resultado positivo: un resultado positivo en la prueba de Ehrlich se indica por la aparición de un color rojo a morado o azul violeta. Luego, el color cambia a azul con la adición de NaNO 2 . Esto indica que la muestra contiene triptófano.
- Resultado negativo: un resultado negativo en la prueba de Ehrlich se indica por la ausencia de color azul violeta en la adición del reactivo de Ehrlich. Esto indica que la muestra no contiene triptófano.
Usos
- Esta prueba es una prueba de aldehído que se utiliza para la detección de triptófano en una muestra de proteína.
- La prueba se utiliza para el diagnóstico de enfermedades como la fiebre tifoidea y otros trastornos del proceso hemolítico de la obstrucción del colédoco.
- La prueba también se puede utilizar para la detección de compuestos psicoactivos y drogas como triptaminas y ergoloides.
- La prueba de Ehrlich detecta la presencia de indoles y urobilinógeno. La presencia de urobilinógeno en alta concentración en la muestra de orina ayuda en el diagnóstico de ictericia hepática y hepatitis.
Limitaciones
- La reacción de falso negativo puede ocurrir en presencia de infección del tracto urinario, ya que los nitritos oxidan el urobilinógeno a urobilina.
- Un resultado falso negativo durante la terapia con antibióticos, ya que algunas bacterias intestinales que producen urobilinógeno podrían destruirse.
- Esta prueba es una prueba específica para aldehído o triptófano y no detecta otros aminoácidos o proteínas.
Dr. Martin Passen, a dedicated nutrition educator with a master’s in nutrition education and nearing completion of a clinical nutrition and dietetics master’s. Passionate about sharing valuable information effectively.