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¿Qué es la prueba CAMP?
La prueba CAMP (Christie-Atkins-Munch-Peterson) es una prueba bioquímica que se utiliza para diferenciar Streptococcus agalactiae de otros estreptococos beta-hemolíticos.
- S. agalactiae es el único miembro de los estreptococos del grupo B que se separa de otros estreptococos beta-hemolíticos por la demostración de una gran área de hemólisis cuando se cultiva con Staphylococcus aureus.
- Esta prueba se utiliza para la identificación presuntiva de Streptococcus del grupo B ( Streptococcus agalactiae ), que es el único Streptococcus beta-hemolítico que arroja una prueba CAMP positiva.
- S. agalactiae es un patógeno importante que causa enfermedades invasivas en humanos y mastitis en vacas.
- La prueba CAMP detecta el factor CAMP, que es una proteína termoestable producida por estreptococos del grupo B como resultado de la asociación sinérgica entre Streptococcus agalactiae y Staphylococcus aureus .
- El factor CAMP se denominó factor CAMP por las iniciales de los autores del artículo que describió por primera vez el fenómeno.
- Una prueba CAMP inversa es otra prueba bioquímica que utiliza un principio similar, excepto que la prueba positiva se demuestra mediante la formación de una flecha sin hemólisis en la intersección del organismo que se está analizando y los estafilococos.
Objetivos de la prueba CAMP
- Diferenciar Streptococcus agalactiae de otros estreptococos beta-hemolíticos.
- Detectar la capacidad de un organismo para producir el factor CAMP.
Principio de la prueba CAMP
- Streptococcus agalactiae produce una proteína extracelular difusible y termoestable que interactúa sinérgicamente con la beta-hemolisina producida por Staphylococcus aureus, lo que da como resultado una zona de mayor lisis de eritrocitos de oveja o bovino.
- La prueba CAMP estándar se basa en la elaboración de dos toxinas durante el crecimiento para formar una punta de flecha típica o un claro en forma de llama en la unión de los dos organismos que están rayados perpendicularmente entre sí.
- La prueba rápida de disco utiliza un extracto de beta-hemolisina estafilocócica que interactúa directamente con el factor CAMP ya difundido en el medio alrededor de la colonia de S. agalactiae .
- La hemólisis producida por las cepas beta-hemolíticas de Staphylococcus aureus se ve reforzada por la proteína extracelular producida por los estreptococos del grupo B.
- La interacción de la beta-hemolisina de Staphylococcus aureus con el factor CAMP de los estreptococos del grupo B da como resultado una hemólisis sinérgica, lo que da como resultado una zona de hemólisis en punta de flecha.
- Una reacción CAMP positiva está indicada por un aumento de la hemólisis dentro de los 30 minutos posteriores a la adición del reactivo de factor CAMP.
- La prueba es útil para identificar tanto S. agalactiae como muchos bacilos grampositivos, incluida Listeria monocytogenes .
Microorganismo probado
- Cocos grampositivos en pares y cadenas catalasa-negativos, con colonias blanquecinas, lisas y de tamaño mediano con un pequeño halo de beta-hemólisis. También se pueden probar los aislados no hemolíticos, ya que el factor CAMP todavía puede estar presente.
- Bacilos grampositivos, como parte de su identificación.
- Cocos grampositivos en racimos, como parte de la identificación de estafilococos a nivel de especie, si se utiliza Staphylococcus intermedius como cepa que suministra la hemolisina.
Medios, reactivos y suministros utilizados
Medios de comunicación
- Agar de sangre
Reactivo
- Reactivo de beta-lisina
- Cultura de aureus
- Reactivos comerciales: Discos que contienen beta-lisina de aureus
Suministros
- Palillos aplicadores de madera esterilizados o asas bacteriológicas
- Agua destilada
- Placa de Petri y portaobjetos
Procedimiento de la prueba CAMP
La prueba CAMP se puede realizar mediante la prueba estándar en placas de agar sangre o el método del disco.
Método estándar
- S. aureus se extiende sobre el agar sangre en línea recta a lo largo del centro de la placa.
- El microorganismo desconocido se raya entonces de la misma manera perpendicular al estafilococo evitando que el organismo toque el área previamente rayada.
- El organismo de control positivo tiene rayas paralelas y aproximadamente a 1 pulgada del organismo desconocido.
- Cada racha de los platos está etiquetada en la parte posterior del plato.
- La placa se incuba durante la noche a 35 ° C en una incubadora de CO2.
Método de disco
- El disco se extrae del vial y se coloca en una placa de agar sangre calentada .
- El microorganismo tiene rayas de 2 a 3 mm desde el borde del disco.
- La placa se incuba durante la noche a 35 ° C en una incubadora de CO2.
Control de calidad
Como forma de control de calidad para la prueba CAMP, se pueden tomar dos organismos diferentes como control positivo y negativo.
Control | Incubación | Resultados |
Streptococcus agalactiae | Incubación durante 24-48 horas a 33-37 ° C en el aire con 5% de CO 2 | CAMP positivo; formación de hemólisis en punta de flecha en la intersección de las rayas. |
Streptococcus pyogenes | Incubación durante 24-48 horas a 33-37 ° C en el aire con 5% de CO 2 | CAMP negativo; β-hemólisis sin punta de flecha realzada. |
Resultado e interpretación de la prueba CAMP
- Un resultado positivo en el ensayo estándar es la formación de una punta de flecha distinta de hemólisis en la intersección de las rayas de Staphylococcus y del organismo de prueba.
- Un CAMP inverso positivo o fosfolipasa D se indica mediante una punta de flecha típica sin hemólisis en la unión de los dos organismos hemolíticos.
- En el caso de la prueba del disco, un resultado positivo se demuestra por una zona distinta en forma de arco de hemólisis completa en el punto de interacción del disco con beta-lisina y el microorganismo de prueba.
- La falta de hemólisis aumentada cerca de la colonia que se está analizando es una prueba negativa.
Informe de resultado
- Un organismo de prueba que da una prueba CAMP positiva y tiene las características morfológicas y bioquímicas (cocos grampositivos catalasa negativos en pares y cadenas) de las especies de Streptococcus se informa como Streptococcus agalactiae .
- Los siguientes varillas Gram-positivas son CAMP positivo de la prueba: Rhodococcus equi , monocytogenes , Propionibacterium avidum / granuloso , Actinomyces neuii , Turicella otitidis , glucuronolyticum Corynebacterium , Corynebacterium coyleae , imitans Corynebacterium , y algunas cepas de la striatum Corynebacterium y Corynebacterium afermentans grupo.
Usos de la prueba CAMP
- La prueba CAMP se utiliza para diferenciar Streptococcus agalactiae de otras especies de Streptococcal.
- La prueba se utiliza para identificar Listeria monocytogenes, que es un organismo CAMP positivo.
- Puede usarse para determinar la capacidad de un organismo para producir el factor CAMP.
Limitaciones de la prueba CAMP
- Se puede observar un aumento de la hemólisis inespecífica en las intersecciones (un efecto de “cerilla”) con otros estreptococos, pero solo los estreptococos del grupo B producirán una punta de flecha definida. Verifique el estreptococo del grupo B típico, la morfología de la colonia y la hemólisis.
- Los aislamientos con una prueba CAMP negativa aún podrían ser S. agalactiae y requerir más pruebas.
- pyogenes puede dar una reacción que puede interpretarse como positiva. Cuando hay una duda, S. pyogenes es pirrolidonil-β-naftilamida (PYR) positivo, pero S. agalactiae es PYR negativo.
- La prueba CAMP separa L. monocytogenes , el patógeno humano, de la mayoría de las demás especies de Listeria .
- Si el agar es demasiado delgado o hemolizado, la reacción puede ser débil.
Dr. Martin Passen, a dedicated nutrition educator with a master’s in nutrition education and nearing completion of a clinical nutrition and dietetics master’s. Passionate about sharing valuable information effectively.